Radikal bebas dari metabolisme tubuh maupun faktor eksternal seperti polusi dapat memicu stres oksidatif yang merusak sel dan jaringan, sehingga diperlukan sumber antioksidan alami. Kombucha pegagan (Centella asiatica L.) diketahui memiliki aktivitas antioksidan yang lemah meskipun ekstrak pegagan sendiri berkhasiat kuat, sehingga diperlukan penambahan herbal untuk meningkatkan bioaktivitasnya. Daun pandan (Pandanus amaryllifolius Roxb.) mengandung senyawa fenolik dan flavonoid serta terbukti meningkatkan kadar vitamin C dan aktivitas antioksidan dalam fermentasi. Namun, kombinasi daun pandan dengan kombucha pegagan belum pernah diteliti. Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh penambahan infusa daun pandan terhadap aktivitas antioksidan kombucha pegagan serta menentukan konsentrasi optimalnya. Metode eksperimental laboratorium dilakukan dengan fermentasi kombucha pegagan selama 14 hari, kemudian ditambahkan infusa daun pandan pada konsentrasi 0,5%, 1%, dan 1,5%, lalu disimpan 48 jam pada suhu <6°C. Aktivitas antioksidan diuji dengan metode DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) menggunakan spektrofotometer UV-Vis dan dinyatakan sebagai nilai IC50. Hasil penelitian menunjukkan aktivitas antioksidan kombucha pegagan tanpa penambahan memiliki nilai IC50 sebesar 25,7584%. Penambahan infusa daun pandan konsentrasi 0,5%, 1%, dan 1,5% menghasilkan nilai IC₅₀ berturut-turut sebesar 23,61%, 22,78%, dan 21,23%. Penambahan infusa daun pandan meningkatkan aktivitas antioksidan kombucha pegagan yang ditandai dengan penurunan nilai IC50, dengan konsentrasi 1,5% sebagai konsentrasi optimal yang menghasilkan aktivitas antioksidan tertinggi.