Karies gigi menjadi masalah kesehatan gigi yang serius, salah satunya disebabkan oleh bakteri Streptococcus mutans. Penggunaan antibiotic tidak rasional menimbulkan resistensi, sehingga diperlukan alternatif antibakteri dari bahan alam. Buah kayu putih (Melaleucae leucadendrae L.) berpotensi sebagai antibakteri karena kandungan senyawa metabolit sekundernya. Tujuan penelitian menilai aktivitas antibakteri ekstrak buah kayu putih terhadap bakteri Streptococcus mutans dengan variasi konsentrasi terhadap zona hambat yang dihasilkan. Ekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%, dilakukan pengujian antibakteri metode difusi cakram pada konsentrasi 20%, 40%, 60%, dan 80%. Pada konsentrasi ekstrak 20% zona hambat sebesar 6,71±0,387mm kategori sedang, 40% sebesar 8,07±0,587mm kategori sedang, 60% sebesar 9,7±0,151mm kategori sedang, 80% sebesar 11,24±0,790 mm kategori kuat. Kesimpulan, ekstrak buah kayu putih (Melaleucae leucadendrae L.) memiliki aktivitas antibakteri terhadap Streptococcus mutans pada konsentrasi 20%,40%,60% kategori sedang 80% kategori kuat.